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江蘇L-巖藻糖廠家
L-巖藻(zao)糖
試劑準備:
1. 使用前(qian)將所有(you)的試劑和標(biao)本(ben)緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解(jie)。
2. 標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品(凍干品):每瓶標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品加(jia)入(ru)標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品稀(xi)釋液(ye)1mL,蓋好后(hou)室溫靜置大約(yue)10分鐘,同時反復顛倒(dao)/搓動以助(zhu)溶(rong)解,其(qi)濃度為2000pg/mL。準(zhun)(zhun)(zhun)備7個稀(xi)釋標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品的(de)EP管,每個EP管中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品稀(xi)釋液(ye),如(ru)圖(tu)所示依(yi)次倍(bei)比(bi)稀(xi)釋成不同的(de)梯度, 標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作為空白孔。為保(bao)證實(shi)驗(yan)結果有效性,每次實(shi)驗(yan)請使用新的(de)標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)品溶(rong)液(ye)。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水(shui)或去離(li)子水(shui)將20mL濃洗滌液稀釋(shi)(shi)至(zhi)600mL,進(jin)行30倍稀釋(shi)(shi)。
樣(yang)品(pin)收集(ji)、處理及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法:
1)血清(qing)(qing)-----操作過程中避(bi)免任何細(xi)胞(bao)刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收(shou)集血液(ye)后,1000×g離(li)心(xin)10分鐘將血清(qing)(qing)和紅細(xi)胞(bao)迅速小心(xin)地(di)分離(li)。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝(gan)素(su)血漿可用于檢(jian)測(ce)。1000×g離心30分鐘去除顆(ke)粒。
3)細胞上(shang)清液---1000×g離(li)心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適(shi)量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘(zhong),取上清液
5)保(bao)存(cun)------如(ru)果樣品不立即使(shi)用,應將(jiang)其分(fen)成小(xiao)部分(fen)-70 ℃保(bao)存(cun),避免反復冷凍(dong)。盡(jin)可能的(de)不要使(shi)用溶血或高(gao)血脂血。如(ru)果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾(lv)。不要在(zai)37℃或更高(gao)的(de)溫度(du)加(jia)熱(re)解凍(dong)。應在(zai)室(shi)溫下解凍(dong)并確保(bao)樣品均勻地(di)充分(fen)解凍(dong)。
江蘇L-巖藻糖廠家